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本制品提供了简单而又超快速地制备15% SDS-PAGE凝胶分离胶所需的主要试剂，包括Tris-HCl (pH8.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等。本分离胶预混液已经把15%的SDS-PAGE凝胶配制所需的Tris-HCl(pH8.8)、Acr-Bis(29:1)、SDS等预混合好，使用前仅需加入适量凝胶聚合催化剂(过硫酸铵或其替代物，如过硫酸铵替代物，货号：YTB3599)和TEMED替代物即可简单快速地完成分离胶(下层胶)的配制。

SDS-PAGE分离胶预混液系列产品有6%、8%、10%、12%和15%共5种常见浓度供您选择，如您需要配制其他浓度凝胶，可以考虑购买SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒(货号：YT048)、PAGE胶制备试剂盒(货号：YT047)，或单独购买30% Acr-Bis(29:1)、10% SDS和1M Tris-HCl(pH8.8)等进行各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的配制。

分离胶配制完成后，可以直接配合使用SDS-PAGE浓缩胶预混液(货号：YTB3523)，轻松超快速完成15% SDS-PAGE凝胶的配制。也可以直接选购15% SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒(货号：YTB3562)。

本制品的250mL包装约可配制30-50块常规大小的15% SDS-PAGE凝胶的分离胶，500mL包装约可配制60-100块常规大小的15% SDS-PAGE凝胶的分离胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。

• 进行分离胶配制时，需要另外准备过硫酸铵或过硫酸铵替代物以及TEMED替代物。
  
• 本制品含有Acr-Bis，对人体有毒，操作时请特别小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

• 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE分离胶(即下层胶)。
  不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下：
  

  SDS-PAGE分离胶浓度	最佳分离范围
  6%胶	50～150kD
  8%胶	30～90kD
  10%胶	20～80kD
  12%胶	12～60kD
  15%胶	10～40kD

• 称取适量过硫酸铵或其替代物，如过硫酸铵替代物(货号：YTB3599)，用双蒸水或其它高纯度的水配制10%溶液。过硫酸铵或其替代物配成溶液后容易失效，需注意存放及时间限制。
  
• 参考下表，在15% SDS-PAGE分离胶预混液中，按照1%的比例加入相应量的10%过硫酸铵或其替代物溶液，按照0.04%的比例加入相应量的TEMED。例如10mL 15% SDS-PAGE分离胶预混液中，加入100μL 10%过硫酸铵或其替代物溶液和4μL TEMED。适当混匀后倒入到制胶模具中，用异丙醇、0.1% SDS或蒸馏水封住液面，直至分离胶凝固充分。通常10～30分钟内胶会凝固。
  注：具体的凝固时间和温度及光照有关，说明书中10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的正常推荐用量是室温为25℃时的推荐用量。为达到与25℃时相近的凝固时间，当室温低于25℃时，可以适当同时加大10%过硫酸铵或其替代物和TEMED的用量，例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍，15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。
  

  成分	配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(mL)
  15% SDS-PAGE分离胶预混液	5	10	15	20	30	50
  10%过硫酸铵或其替代物	0.05	0.1	0.15	0.2	0.3	0.5
  TEMED	0.002	0.004	0.006	0.008	0.012	0.02

• 在分离胶凝固后，将其上面用于封胶的液体倒掉并吸干后，即可进行SDS-PAGE浓缩胶的配制。可以自行配制浓缩胶也可选用SDS-PAGE浓缩胶预混液(货号：YTB3523)进行配制。
  
• 配制好的凝胶如果当天不能使用，可以在4℃保存1～2天后使用。